זיהומי טירזפטיד

זיהומי טירזפטיד|בקרת טומאה טילפפטיד|סינתזה מותאמת אישית של טומאה ואישור מבנה|מדע-פפטיד

Tirzepatide Impurities control - עבור GLP-1/GIP דואלי-מחקר איכות תרופות, דיווח על תרופות גנריות.Science-Peptide מספק סינתזה מותאמת אישית של זיהומים הקשורים ל-tilpeptide, כולל פפטידים מחיקה, זיהומים מחומצנים, חומצות שומן, תמיכה במוצרי פילינג וכו'. מחקר ספקטרוסקופיה של טומאה עם נתוני אישור מבניים. מוזמן לפנות אלינו.

Tirzepatide (Tirzepatide) הוא האגוניסט הכפול GLP-1/GIP שאלי לילי המציא, והוא נמצא בעיצומו השנתיים הללו. יש לה השפעה טובה של הורדת סוכר והשפעה חזקה של הפחתת משקל, והיא נקראת הגרסה המשודרגת של "תרופת הפלא לירידה במשקל". יצרנים מקומיים של תרופות גנריות פפטידים, רבים בוהים בו - לאחר פקיעת הפטנט, מי יכול קודם לרוץ את איכות המחקר, למי תהיה ההזדמנות לתפוס את הגנרי הראשון.

 

עם זאת, איכות הטילפפטיד לא כל כך קלה למחקר. הוא מורכב יותר מסימטיקון, עם 39 חומצות אמינו, שרשרת צד של חומצות שומן (חומצה איקוסנדיואית) ומקשר. הזיהומים שעלולים להופיע במהלך תהליך הסינתזה גבוהים בהרבה מאלה של פפטידים רגילים. פפטידים חסרים, זיהומים חמצוניים, מוצרי נשירה של חומצות שומן, דימרים, זיהומים הקשורים לקישורים-צריכים להיות בעלי שליטה, כל אחד צריך להיות ברור.

 

צברנו ניסיון רב בסינתזה של זיהומים פפטידים מורכבים. התמקצענו בחקר טילפפטיד, ואנו יודעים מה הם הקשיים בפרופיל הטומאה שלו ומהם פריטי הבקרה החיוניים. אנו יכולים להתאים אישית את הסינתזה של בקרות שונות של טומאות טילפפטיד בהתאם לצרכים שלך, עם נתוני אישור מבנה, ולעזור לך לבסס את השיטה כך שפחות סביר שיונפק לך תוסף בעת ההגשה.

המבנה המולקולרי של טילפפטיד קובע שפרופיל הטומאה שלו מורכב הרבה יותר מזה של פפטידים כלליים. כאשר אנו עושים מחקרי טומאה, אנו מתמקדים בעיקר בקטגוריות הבאות:

חסר פפטיד
39 חומצות האמינו, שכל אחת מהן הוחמצת במהלך תהליך הסינתזה, היא טומאה. זמני השמירה של הפפטידים החסרים ב-HPLC היו מופצים באופן נרחב, עם קוטביות שונה של הפפטידים החסרים במיקומים שונים. חלקם חסרים בקצה ה-N-, חלקם באמצע וחלקם ליד אתר ההתקשרות של חומצות השומן. קיבלנו הזמנה מלקוח עבור 15 פפטידים חסרים במיקומים שונים כדי לאתר את כל הזיהומים החסרים האפשריים בתהליך שלהם.

זיהומים מחמצנים
נפגש ברצף של tilpeptide רגיש לחמצון לסולפוקסיד ולאחר מכן לסולפון. זיהומים מחומצנים מופיעים לעתים קרובות במחקרי יציבות וגדלים לאחר תקופה מסוימת. עשינו השוואה, בתנאים מואצים במשך חודש, שיא החמצון יכול לגדול ליותר מ-0.3%, ללא בקרה.

מוצרים להורדת חומצות שומן
זוהי טומאה ייחודית לטילפפטיד. שרשרת הצד של חומצת השומן שלו (חומצה איקוסאנדיואית) מחוברת לליזין דרך מקשר, ושינוי זה עשוי להישמט באופן חלקי במהלך סינתזה או אחסון, וכתוצאה מכך חומצת שומן-מסירה זיהומים. באופן בעייתי יותר, הנשירה עשויה להתרחש במיקומים שונים - בין חומצת השומן למקשר, או בין המקשר לפפטיד - וכתוצאה מכך זיהומים שונים. סנתזנו מספר זיהומים הקשורים לחומצות שומן- עבור הלקוחות שלנו, החל מהשלכה מלאה ועד לחלק קטן בלבד.

דימרים/פולימרים
שתי מולקולות טילפפטיד או יותר מתקבצות יחד ליצירת דימר ומעלה. המשקל המולקולרי של הדימר הוא פי שניים מהשיא הראשי, ולעתים קרובות זהו שיא רחב ב-HPLC, ולכן יש להפרידו ולטהר אותו במיוחד לפני שניתן יהיה להשתמש בו כבקרה. עשינו הכנת דימרים, ונדרשו מספר סבבי טיהור כדי להגיע לטוהר של יותר מ-95%.

זיהומים הקשורים לקישור-
שינוי חומצת השומן של tilpeptide משתמש בקישור (למשל, -Glu, PEG וכו'), ומקשר זה עצמו עלול לייצר תגובות לוואי במהלך הסינתזה, וליצור זיהומים עם קישורים חסרים או לא שלמים. טומאה מסוג זה אינה מצויה בפפטידים נפוצים, אך היא ייחודית לטילפפטיד, אשר יש לחקור באופן ספציפי.

זיהומים מפורקים
אספרגין (Asn) וגלוטמין (Gln) מנותקים בקלות בתנאי חומציות או חימום, וכתוצאה מכך נוצרים איזומרים. ישנם מספר Asn ו-Gln ברצף של tilpeptide, וטומאה ה-deamidation מופיעה לעתים קרובות בבדיקת הפירוק המאולץ, ולכן יש להשתמש בתוצר הבקרה כדי לאתר את הטומאה.

דיאסטריאואיזומרים
במהלך סינתזת השרשרת הארוכה, חומצות אמינו בודדות עשויות לעבור גזע, וכתוצאה מכך דיאסטריאואיזומרים. התוכן של טומאה מסוג זה בדרך כלל אינו גבוה, אך מומחים ישאלו בעת ההצהרה, ועדיף שיהיה מוצר בקרה לאישור.

לא ניתן לרכוש רבים מהזיהומים הללו ויש לסנתז אותם בהתאמה אישית. עשינו הרבה פרויקטים בנושא התאמה אישית של זיהומי טילפפטיד, המכסים את כל הקטגוריות לעיל.

מחיקת סדרת הפפטידים
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, עם אישור MS ו-NMR. סנתזנו קבוצה של פפטידים עם מרווח של 5 חומצות אמינו ממסוף N-למסוף C-.

זיהומים מחמצנים
Met in Tilpeptide is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control. The purity is >95% ואנחנו יכולים לספק את ספקטרום LC-MS כדי לאשר את מידת החמצון. סולפוקסיד וסולפון מופרדים על ידי HPLC, ואנחנו יכולים לעשות את שניהם.

מוצרים להורדת חומצות שומן
זהו אחד הזיהומים הקשים ביותר לעבוד איתם בטילפפטיד. שרשרת חומצות השומן עשויה להיות כבויה לחלוטין, או שהיא עשויה להיות כבויה חלקית (למשל חסרים הפחמנים האחרונים). אנו יכולים לסנתז סדרה של וריאנטים עבור עמדות שונות של השרשרת. באחד הפרויקטים הכי מסובכים שעשינו, הלקוח ביקש מאיתנו לסנתז טומאה עם 8 פחמנים שחסרים בשרשרת חומצות השומן, ולקח לנו חודשיים לעשות את זה נכון.

דימר
ניתן להכין דימרים הנוצרים על ידי אינטראקציות-צולבות או לא-קוולנטיות בשיטות שונות ולבודד ולטהר כדי לספק בקרות טוהר גבוהות. דימרים קשה לטהר, אבל יש לנו את הניסיון לדעת איך להפריד את המונומרים.

זיהומים הקשורים לקישור-
המקשר (-Glu, PEG וכו') עשוי להיות חסר או לא שלם, וכתוצאה מכך סדרה של זיהומים קשורים. אנו יכולים לסנתז וריאנטים שונים עם קישורים חסרים, קישורים מקוצרים או קישורים לא תואמים, ולעזור לך לבנות את הספקטרום של זיהומים כאלה.

זיהומים מפורקים
עבור אתרי Asn ו-Gln ברצף, אנו יכולים להכין בקרות טומאה מפורקות על ידי פירוק מאולץ או סינתזה ממוקדת. ההבדל במשקל המולקולרי לאחר deamidation הוא רק 1, אשר לא קל להבחין על ידי טרשת נפוצה, אז אנחנו בדרך כלל משתמשים ב-NMR או בתנאים כרומטוגרפיים מיוחדים כדי לאשר.

זיהומים אחרים מותאמים אישית
אם תמצא טומאה לא ידועה במחקר שלך, נוכל לעזור לך לנתח את המבנה ולסנתז אותו. שלח לנו את הדוגמאות, אנו נעשה ניתוח LC-MS, נסיק את המבנה, לאחר מכן סינתזה כיוונית, ולאחר מכן נשווה את זמן השמירה וספקטרום המסה כדי לאשר את ההסכם. עשינו את התהליך הזה פעמים רבות ואחוזי ההצלחה די גבוהים.

פיתוח ותיקוף שיטות אנליטיות
בעת הגדרת שיטת HPLC או LC-MS, נדרשת בקרת טומאה עבור לוקליזציה, קביעת הפרדה, אימות טווח ליניארי והתאוששות. ללא הבקרה, לאימות השיטה חסרה חתיכה. לקוחות רבים מבקשים מאיתנו לבצע תחילה כמה זיהומים מרכזיים כדי להגדיר את השיטה, ולאחר מכן לאט לאט להשלים את השאר.

ספקטרומטריית מסה הטרוגנית
כאשר מוכרזת תרופה גנרית, נדרש ניתוח איכותי וכמותי מקיף של זיהומים בתהליך ותוצרי פירוק. המיקום, התוכן והמבנה של כל טומאה צריכים להיות מאושרים על ידי מוצר בקרה. ראינו שההצהרה של המידע נשלחה למילוי, תשע פעמים מתוך עשר הזיהומים של היצירה הזו לא הבינו.

לימודי יציבות
ביציבות-ארוכת טווח ובבדיקות מואצות, יש צורך לקבוע אילו מוצרי השפלה הם הדומיננטיים ומהי המגמה בתוכן. עם בקרת הטומאה, אנו יכולים לכמת ולנטר במדויק. לקוח עשה את היציבות של הכנת tilpeptide, ומצא שפס פירוק גדל מהר מאוד בתנאים מואצים, אז ניתחנו וסינתזנו אותו על ידי MS כדי לאשר את המבנה, ואז הלקוח הוקל לדווח על כך.

בדיקת שחרור אצווה
לאחר המסחור, כל אצווה של API או פורמולציה צריכה להיבדק עבור החומר המדובר. בקרות טומאה הן כלים חיוניים לבדיקת שחרור.

מידע על הצהרות תרופות גנריות
מחקרי טומאה הם חלק מרכזי במידע ההגשה. מתן נתוני פרופיל ושליטה מלאים של טומאה מפחית באופן משמעותי את הסיכון לשחרור סקירה.

מקרה 1: חברת תרופות, תוכנית תרופות גנרית לפפטיד
הם מפתחים גרסה גנרית של tilpeptide וזקוקים לסט שלם של בקרות טומאה לצורך אימות השיטה. התאמנו עבורם 12 זיהומים: 5 פפטידים חסרים, 2 זיהומים מחומצנים, 1 דימר, 2 מוצרים לנשירת חומצות שומן, ו-2 זיהומים הקשורים לקישור-. לכל אחד מהם טוהר של יותר מ-95%, והוא מלווה בנתוני MS ו-NMR. מנהיג הפרויקט אמר, "הזיהומים של tilpeptide הם פי שניים מאשר פפטידים אחרים, אבל אתה יכול לעשות את כולם, והנתונים מלאים, מה שחוסך לנו הרבה עבודה". בהמשך, אימות השיטה שלהם הסתיים בהצלחה, וכעת הם מתכוננים להכרזה.

מקרה 2: חברת CRO, פרופיל טומאה
הם ביצעו פרויקט מחקר איכותי על טילפפטיד, שדרש ניתוח מקיף של זיהומים בתהליך. הם שלחו לנו את דגימות הפפטידים הגולמיים, וביצענו ניתוח LC-MS, הסקנו את המבנים האפשריים של כמה זיהומים לא ידועים, ולאחר מכן סינתזנו אותם בצורה ממוקדת, והשווינו זמני שמירה וספקטרום מסה, ואישרנו ארבעה זיהומים חדשים - שניים מהם קשורים לקישור-, ושניים מהם היו וריאנטים של פליטת חומצות שומן. הלקוח השתמש בנתונים אלה כדי לחדד את פרופילי הטומאה ועבר בהצלחה את קבלת הלקוח.

מקרה 3: מחקרי יציבות, חברת ביוטכנולוגיה
הם בחנו את היציבות של ניסוח טילפפטיד ומצאו שכמות תוצר הפירוק גדלה במהירות בתנאים מואצים, אבל הם לא ידעו מה זה. ניתחנו את המדגם על ידי LC-MS והנחנו שמדובר בטומאת דאמידציה באתר Asn מסוים, ולאחר מכן סינתזנו אותה בצורה ממוקדת ואישרנו אותה בהשוואה. הם הקימו בדיקה באמצעות בקרה זו וניטרו במדויק את מגמת מוצר הפירוק. בהמשך, עם הגשת הדו"ח, הודגש חלק זה בנתונים על ידי המומחים, ובגלל הנתונים המוצקים לא ניתן פיצוי.

Tilpeptide הוא מוצר פופולרי, אבל מחקר זיהומים הוא עבודה עדינה, במיוחד מוצרי פילינג חומצות שומן וזיהומים הקשורים לקישור-, שיצרנים רבים לא יכולים להתמודד איתם. אם אתם מבצעים מחקר איכותי או פיתוח גנרי של טילפפטיד וזקוקים לשליטה בטומאה, אנא אל תהסס לפנות אלינו. עשינו הרבה עבודה, אנחנו יודעים מה הקשיים, ואנחנו יודעים איך לצאת מזה.