זיהומי סמגלוטייד

זיהומי סמגלוטייד|בקרת טומאה סימגלוטיד|סינתזה מותאמת אישית של טומאה ואישור מבנה|מדע-פפטיד

בקרת זיהומים של Soma Lutide (Simeglutide) - עבור GLP-מחקר איכות תרופה אחד, הגשת תרופה גנרית.Science-Peptide מספקת סינתזה מותאמת אישית של זיהומים הקשורים ל-Soma Lutide, כולל פפטידים חסרים, זיהומים מחומצנים, מוצרי פילינג חומצות שומן, זיהומים הקשורים לשרשרת PEG, זיהומים הקשורים ל-PEG וכו'. אנו יכולים לתמוך במחקר פרופיל הטומאה שלך. מוזמן לפנות אלינו.

Semaglutide (הידוע גם בשם Semaglutide) בוער בשנים אלה. נובו נורדיסק מסתמכת עליה כדי לדחוף את שווי השוק ליצרניות המקומיות של גנריות פפטידים, בעולם השניות, כמעט בלי לבהות בה. צורת מינון דרך הפה וצורת מינון להזרקה הם כולם שווקים גדולים. לאחר פקיעת הפטנט, מי יכול לעשות קודם את מחקר האיכות, למי תהיה ההזדמנות לתפוס את הגנרי הראשון.

 

עם זאת, מחקר האיכות של סומטוסטטין הוא, למען האמת, קשה יותר מזה של פפטידים רבים. זהו פפטיד 31- עם שרשרת חומצות שומן (חומצה אוקטדקנדודית) ומקשר PEG. מבנה זה קובע שספקטרום הטומאה שלו הוא עשיר במיוחד בפפטידים חסרים -, זיהומים מחומצנים, מוצרי נשירה של חומצות שומן, זיהומים הקשורים לשרשרת PEG, לדימרים כל אחד צריך להיות בעל שליטה, כל אחד צריך להיות ברור. במיוחד שרשרת ה-PEG, שאינה מצויה בפפטידים רגילים, היא ייחודית לסומלוטיד.

 

צברנו ניסיון רב בסינתזה של זיהומים פפטידים מורכבים. התמקצענו בחקר הסומטוסטטין, ואנו יודעים מה הם הקשיים בפרופיל הטומאה שלו ומהם פריטי הבקרה החיוניים. אנו יכולים להתאים אישית את הסינתזה של בקרות שונות של זיהומי Semaglutide בהתאם לצרכים שלך, עם נתוני אישור מבניים, ולעזור לך לבסס את השיטה, כך שתהיה פחות סיכוי שיונפק לך תוספת בעת הגשה.

המבנה המולקולרי של סומטוסטטין קובע שפרופיל הטומאה שלו מורכב הרבה יותר מזה של פפטידים רגילים. כאשר אנו עושים מחקרי טומאה, אנו מתמקדים בעיקר בקטגוריות הבאות:

חסר פפטיד
31 חומצות האמינו, שכל אחת מהן הוחמצת במהלך תהליך הסינתזה, היא טומאה. זמני השמירה של הפפטידים החסרים ב-HPLC היו מופצים באופן נרחב, עם קוטביות שונה של הפפטידים החסרים במיקומים שונים. חלקם חסרים בקצה ה-N-, חלקם באמצע וחלקם ליד אתר ההתקשרות של חומצות השומן. קיבלנו הזמנה מלקוח שביקש תריסר פפטידים חסרים בעמדות שונות כדי לאתר את כל הזיהומים החסרים האפשריים בתהליך שלהם.

זיהומים מחמצנים
בסומלוטיד יש מתיונין (Met) ברצף שלו, הרגיש לחמצון לסולפוקסיד ולאחר מכן לסולפון. זיהומים מחומצנים מופיעים לעתים קרובות במחקרי יציבות וגדלים לאחר תקופה מסוימת. עשינו השוואה, בתנאים מואצים במשך חודש, שיא החמצון יכול לגדול ליותר מ-0.3%, ללא בקרה.

מוצרים להורדת חומצות שומן
שרשרת הצד של חומצת השומן (חומצה אוקטדקנדואית) של סומטוסטטין מחוברת לליזין דרך מקשר, ושינוי זה עשוי להישמט באופן חלקי במהלך סינתזה או אחסון. באופן בעייתי יותר, הנשירה יכולה להתרחש במיקומים שונים - בין חומצת השומן למקשר, ובין המקשר לפפטיד - וכתוצאה מכך זיהומים שונים. סנתזנו מספר זיהומים הקשורים לחומצות שומן- עבור הלקוחות שלנו, החל מנשירה מלאה ועד לקטע קטן בלבד.

זיהומים הקשורים לשרשרת PEG-
זהו סוג הטומאה הספציפי ביותר בסומטוסטטין. יש לו מקשר PEG (פוליאתילן גליקול), ושרשרת ה-PEG עשויה להישבר, לקצר או להתפלמר במהלך הסינתזה, וכתוצאה מכך לסדרה של זיהומים קשורים. זיהומים אלו אינם מצויים בפפטידים רגילים, אך הם ייחודיים לסומטוסטטין, וקשה לחקור אותם במחקרים איכותיים. יצרנו גרסאות שונות של מחיקת שרשרת PEG, קיצור שרשרת PEG וחמצון שרשרת PEG.

דימרים/פולימרים
שתי מולקולות סומטוסטטין או יותר מתקבצות יחד ליצירת דימר ומעלה. המשקל המולקולרי של הדימר הוא פי שניים מהשיא הראשי, ולעתים קרובות זהו שיא רחב ב-HPLC, ולכן יש להפרידו ולטהר אותו במיוחד לפני שניתן יהיה להשתמש בו כבקרה. עשינו הכנת דימרים, ונדרשו מספר סבבי טיהור כדי להגיע לטוהר של יותר מ-95%.

זיהומים מפורקים
אספרגין (Asn) וגלוטמין (Gln) מנותקים בקלות בתנאי חומציות או חימום, וכתוצאה מכך נוצרים איזומרים. ישנם מספר Asn ו-Gln ברצף של סומטוסטטין, וטומאת הדאמידציה מופיעה לעתים קרובות בבדיקת הפירוק המאולץ, ולכן יש להשתמש בתוצר הבקרה כדי לאתר את הטומאה.

דיאסטריאואיזומרים
במהלך סינתזת השרשרת הארוכה, חומצות אמינו בודדות עשויות לעבור גזע, וכתוצאה מכך דיאסטריאואיזומרים. התוכן של טומאה מסוג זה בדרך כלל אינו גבוה, אך מומחים ישאלו בעת ההצהרה, ועדיף שיהיה מוצר בקרה לאישור.

לא ניתן לרכוש רבים מהזיהומים הללו ויש לסנתז אותם בהתאמה אישית. כבר עשינו הרבה פרויקטים על התאמה אישית של זיהומים סומטוסטטין, המכסים את כל הקטגוריות לעיל.

מחיקת סדרת הפפטידים
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, עם אישור MS ו-NMR. סנתזנו קבוצה של פפטידים עם מרווח של 5 חומצות אמינו ממסוף N-למסוף C-.

זיהומים מחמצנים
Met in Somatostatin is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. The purity of the product is >95%, ואנחנו יכולים לספק את ספקטרום LC-MS כדי לאשר את מידת החמצון. סולפוקסיד וסולפון מופרדים על ידי HPLC, ואנחנו יכולים לעשות את שניהם.

מוצרים להורדת חומצות שומן
זהו המוקד העיקרי של זיהומי סומאלוטיד. שרשרת חומצות השומן עשויה להתנתק לחלוטין או חלקית. אנו יכולים לסנתז סדרה של וריאנטים עבור עמדות שונות של נשירה. באחד הפרויקטים הכי מסובכים שעשינו אי פעם, הלקוח ביקש מאיתנו לסנתז טומאה עם 6 פחמנים שחסרים בשרשרת חומצות השומן, ולקח לנו חודשיים לעשות את זה נכון.

זיהומים הקשורים לשרשרת PEG-
זהו אחד הזיהומים הקשים ביותר של סומטוסטטין, וזה גם הכוח שלנו. שרשרת PEG עשויה להיות חסרה, מתקצרת, שבורה, מתחמצנת, וייתכנו גרסאות שונות. עשינו את הטומאה עם שרשרת ה-PEG חסרה לחלוטין (כלומר דה-PEGylated somatostatin), הגרסה עם אורך שרשרת ה-PEG חצוי, והמוצר עם שרשרת ה-PEG מחומצן. ללקוח ניתנו בקרות אלה, והספקטרום של הטומאה הקשורה ל-PEG- הוקמה במלואה.

דימר
ניתן להכין דימרים הנוצרים על ידי אינטראקציות-צולבות או לא-קוולנטיות בשיטות שונות ולבודד ולטהר כדי לספק בקרות טוהר גבוהות. דימרים קשה לטהר, אבל יש לנו את הניסיון לדעת איך להפריד את המונומרים.

זיהומים מפורקים
עבור אתרי Asn ו-Gln ברצף, אנו יכולים להכין בקרות טומאה מפורקות על ידי פירוק מאולץ או סינתזה ממוקדת. ההבדל במשקל המולקולרי לאחר deamidation הוא רק 1, אשר לא קל להבחין על ידי טרשת נפוצה, אז אנחנו בדרך כלל משתמשים ב-NMR או בתנאים כרומטוגרפיים מיוחדים כדי לאשר.

Dther זיהומים מותאמים אישית
אם תמצא טומאה לא ידועה במחקר שלך, נוכל לעזור לך לנתח את המבנה ולסנתז אותו. שלח לנו את הדוגמה, אנו נעשה את ניתוח LC-MS, נשער את המבנה, לאחר מכן סינתזה כיוונית, ולאחר מכן נשווה את זמן השמירה וספקטרום המסה כדי לאשר את ההסכם. עשינו את התהליך הזה פעמים רבות ואחוזי ההצלחה די גבוהים.

פיתוח ותיקוף שיטות אנליטיות
בעת הגדרת שיטת HPLC או LC-MS, נדרשת בקרת טומאה עבור לוקליזציה, קביעת הפרדה, אימות טווח ליניארי והתאוששות. ללא הבקרה, לאימות השיטה חסרה חתיכה. לקוחות רבים מבקשים מאיתנו לבצע תחילה כמה זיהומים מרכזיים כדי להגדיר את השיטה, ולאחר מכן לאט לאט להשלים את השאר.

ספקטרומטריית מסה הטרוגנית
כאשר מוכרזת תרופה גנרית, נדרש ניתוח איכותי וכמותי מקיף של זיהומים בתהליך ותוצרי פירוק. המיקום, התוכן והמבנה של כל טומאה צריכים להיות מאושרים על ידי מוצר בקרה. ראינו את ההצהרה של המידע נשלח כדי להשלים, תשע פעמים מתוך עשר הוא הזיהומים של היצירה הזו לא הבין.

לימודי יציבות
ביציבות-ארוכת טווח ובבדיקות מואצות, יש צורך לקבוע אילו מוצרי השפלה הם הדומיננטיים ומהי המגמה בתוכן. עם בקרת טומאה, ניתן לכמת ולנטר במדויק. לקוח עשה את היציבות של תכשיר סומטוסטטין, ומצא שפס פירוק גדל במהירות בתנאים מואצים, אז ניתחנו אותו על ידי MS וסינתזנו אותו כדי לאשר את המבנה, ואז הלקוח חש הקלה לדווח על כך.

בדיקת שחרור אצווה
לאחר המסחור, כל אצווה של API או פורמולציה צריכה להיבדק עבור החומר המדובר. בקרות טומאה הן כלים חיוניים לבדיקת שחרור.

מידע על הצהרות תרופות גנריות
מחקרי טומאה הם חלק מרכזי במידע ההגשה. מתן נתוני פרופיל ושליטה מלאים של טומאה מפחית באופן משמעותי את הסיכון לשחרור סקירה.

מקרה 1: חברת תרופות, תוכנית תרופות גנרית Somalutide
הם מפתחים גרסה גנרית של סומטוסטטין וזקוקים לסט שלם של בקרות טומאה לצורך אימות השיטה. התאמנו עבורם 15 זיהומים: 6 פפטידים חסרים, 2 זיהומים מחומצנים, 1 דימר, 2 מוצרי פילינג חומצות שומן, 3 זיהומים הקשורים לשרשרת PEG ו-1 טומאת דאמידציה. הטוהר של כל אחד מהם היה מעל 95%, עם נתוני MS ו-NMR. מנהל הפרויקט אמר, "הזיהומים של Somalutide הם יותר מסובכים מפפטידים אחרים, במיוחד זה PEG, שחיפשנו אחרי מספר חברות, אבל כולם אמרו שהם לא יכולים לעשות את זה. אבל הצלחת לעשות הכל, והנתונים היו מלאים, וזה היה עזר רב". לאחר מכן, אימות השיטה שלהם הושלם בהצלחה, והם נערכים כעת להגשה.

מקרה 2: CRO, מחקר מיוחד על זיהומים בשרשרת PEG
הם ביצעו פרויקט מחקר איכותי בנושא סומטוסטטין, שדרש ניתוח מקיף של הזיהומים הקשורים לשרשרת PEG. סיננתזנו באופן שיטתי את הזיהומים הקשורים ל-PEG-: היעדר מוחלט של שרשרת PEG, חציית אורך שרשרת PEG, חמצון של קצוות שרשרת PEG ופירוק של שרשרת PEG לשני חלקים. סינתזה בסך הכל 8 זיהומים הקשורים ל-PEG-. הלקוח השתמש בפקדים אלה כדי ליצור סט שלם של שיטת זיהוי זיהומי PEG, שהפכה לגולת הכותרת של מידע התיוק שלו.

מקרה 3: מחקרי יציבות, חברת ביוטכנולוגיה
הם ערכו מחקר יציבות של ניסוח סומטוסטטין ומצאו שתכולת מוצר הפירוק גדלה במהירות בתנאים מואצים, אבל הם לא ידעו מה זה. ניתחנו את הדגימה על ידי LC-MS, הנחנו שמדובר בחומצת שומן המפילה טומאה במיקום מסוים, ולאחר מכן סיננתזנו אותה בצורה ממוקדת ואישרנו אותה בהשוואה. הם הקימו בדיקה באמצעות בקרה זו, וניטרו במדויק את המגמה של מוצר השפלה זה. בהמשך, בעת הגשת הדוח, הודגש חלק זה בנתונים על ידי המומחים, ובשל הנתונים המוצקים לא ניתן פיצוי.

Somatostatin הוא מוצר סופר פופולרי, אבל מחקר זיהומים הוא עבודה עדינה, במיוחד זיהומים הקשורים לשרשרת PEG ומוצרי פילינג חומצות שומן, שיצרנים רבים לא יכולים להתמודד איתם. אם אתה עושה מחקר איכותי או פיתוח גנרי של סומטוסטטין, וצריך בקרת טומאה, מוזמן לדבר איתנו. עשינו הרבה עבודה, אנחנו יודעים מה הקשיים, ואנחנו יודעים איך לצאת מזה.